凝血-酶原時間(PT)檢測試劑盒(一期法)使用介紹
更新時間:2024-05-22 點擊次數(shù):324次凝血-酶原時間(PT)檢測試劑盒(一期法)使用介紹
凝-血酶原時間(PT)是指在缺乏血小板的血漿中加入過量的組織凝血活酶和鈣離子,凝血-酶原轉(zhuǎn)化為凝血-酶,導致血漿凝固所需的時間。這個時間是反映血漿中凝血-因子Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ活性的指標。
凝-血酶原時間(PT)檢測試劑盒(一期法)用于檢測人、動物血液的血漿凝-血酶原時間的測定,不僅反映凝-血酶原水平,也反映因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ和纖維蛋白原在血漿中的水平,是外源性凝血系統(tǒng)的篩選實驗試劑盒。
產(chǎn)品的組成:
試劑(A): 檸檬酸鈉抗凝劑(109mM) 20ml
試劑(B): PT 凝血活酶溶液 15ml
自備材料:
1、枸櫞酸鈉抗凝劑采血管、采血針、止血帶、離心機、計時器或秒表、水浴鍋
操作步驟(僅供參考):
1、制備待測血漿:取新鮮待測靜脈血 1.8ml,與 0.2ml 檸檬酸鈉抗凝劑(109mM)按9:1輕輕顛倒混勻。(或用含有 1/10 體積的檸檬酸鈉抗凝劑的塑料管或硅化玻璃管采血)
2、3000rpm(或 2500g)離心 10~15min,收集上層液(缺乏血小板的血漿),轉(zhuǎn)移至塑料試管或離心管,以防止血小板被激活;同時應(yīng)設(shè)正常對照血漿。
3、取待測血漿 0.07ml 與 PT 凝血活酶溶液 0.14ml,分別置于 37℃水浴中,溫育3min。
4、將待測血漿(包括正常對照血漿)與 PT 凝血活酶溶液混合,立即開動秒表計時,不斷輕輕傾斜試管,記錄至液體停止流動所需的時間。重復 2~3 次取平均值,即為凝血酶原時間(PT)。
凝血酶原時間比值(PTR)=待檢血漿的 PT/正常參比血漿的 PT
國際標準化比值(INR)=PTRISI
參考區(qū)間:
PT 值:10~14s,待測者的測量值較正常對照值延長 3s 以上具有臨床意義。以上值僅供參考,由于試劑、人群、儀器等不同,會導致參考值不同,建議各實驗室建立自己的參考范圍。
ISI 值:<2.0s。
注意事項:
1、 以上操作,應(yīng)同時測定正常對照。
2、 采血必須使用一次性塑料注射器或硅化玻璃注射器,貯血必須使用塑料試管或硅化玻璃管,不宜使用普通玻璃容器,避免凝血因子活化。
3、 抽血要順利,抗凝要充分。樣本采集應(yīng)避免溶血及組織污染。
4、 不宜使用肝素、EDTA 或草酸鹽作為抗凝劑。
5、 分離血漿應(yīng)在 2500g 離心 10min 以上,務(wù)必去除血小板。
6、 獲得樣本后應(yīng)及時檢測,一般室溫不應(yīng)超過 1h,4℃不應(yīng)超過 4h,-20℃可保存2周。
7、 血漿預溫不宜超過 5min,PT 凝血活酶溶液預溫不宜超過 15min。
8、 應(yīng)精確控制孵育溫度在 37±1℃,過高或過低均會使 PT 延長。
9、 操作時光線要充足,凝血酶原時間的終點計算以出現(xiàn)混濁的初期凝固為準。
10、 紅細胞比容(Hct)不在 20~55%時,抗凝劑與血液的比例應(yīng)按以下公式調(diào)整:抗凝劑(ml)=(100%-Hct)×血液(ml)×0.00185。
11、 本產(chǎn)品僅用于科研領(lǐng)域,不得用于臨床診斷或其他用途。
12、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。