雌二醇（E2）放免試劑盒怎么使用才符合操作規范
更新時間：2021-01-11 點擊次數：1236次雌二醇（E2）放免試劑盒怎么使用才符合操作規范
英文名：Iodine [125I] Estradiol Radioimmunoassay Kit
漢語拼音：Dian[125I] Ci’erchun Fangshemianyifenxi Yaohe
簡稱：典125I]-E2放免藥盒
【成分】
1. 125I-E2：1瓶，紅色液體。放射性活度＜0.11MBq/瓶（100管）。
2. E2標準品：7瓶，淡黃色液體（去激素人血清配制）。濃度分別為：0；10；50；100；250；500；1000 pg/ml。
3. 兔抗-E2 抗體：1瓶，藍色液體（兔抗）。
4. 質量血清：2瓶，淡黃色液體。參考值范圍：質控血清Ⅰ 56.5±12.8 pg/ml
質控血清Ⅱ 248.6±58.6pg/ml
5. 分離試劑：1瓶，懸浮液（含驢抗兔血清和PEG）。
【放射性核素半衰期】典[125I]物理半衰期（T1/2）為59.7天。
【測定原理】
本藥盒采用競爭性放射免疫分析方法，將放射性標記抗原和非標記待測抗原同時與*特異抗體進行競爭結合反應，通過分離未結合的標記抗原，測定標記抗原-抗體復合物的放射性計數，利用標準曲線和RIA的數學模型計算樣品中待測物質的含量。
【意義】
人體內雌二醇是雌激素中生物活性zui強的雌激素。男性雌二醇由產生，女性則由卵巢分泌。循環血液中的雌二醇絕大部分與性激素結合球蛋白結合，在肝臟代謝，變成水溶性硫酸酯或葡萄糖醛酸酯，經腎臟排出。男性E2水平升高主要是由或肝臟腫瘤所致。女性E2會促進生殖上皮、乳腺、長骨的生長和第二性征的發育。測定E2對青春期前女性內分泌疾病的診斷，對閉經、月經紊亂、卵巢功能評估有重要意義，是研究生殖生理和診斷不孕癥的重要手段。
【禁忌】受檢者在試驗期間不得接受內放射性核素檢查或治療。
【樣品采集】
取靜脈血分離血清，勿需加防腐劑及其它處理，溶血和脂血標本影響測定結果。如不立即測量，可將血清樣品密封后，置于2-8℃或-20℃存儲。2-8℃保存不應超過48小時；-20℃保存不超過2個月，應避免反復凍融。
雌二醇放免試劑盒現貨供應，雌二醇放免試劑盒的使用說明書
【操作程序】
取園底聚苯乙烯試管若干，編號后按以下加樣順序表進行加樣。加樣前所有試劑包括待測樣品要搖勻。為了加樣準確各種試劑和樣品好平衡到室溫之后加樣。
加樣程序表 單位：μl
| 管別 試劑 | 總T管 | NSB管 | S0 管 | S1~6 管 | 樣品或質控管 |
| 純化水 | — | 100 | — | — | — |
| “0”標準品 | — | 100 | 100 | — | — |
| S1~6標準品 | — | — | — | 100 | — |
| 樣品或質控血清 | — | — | — | — | 100 |
| 125I-E2 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 |
| 兔抗-E2 抗體 | — | — | 100 | 100 | 100 |
| 充分混勻置37℃水浴1.5小時。 | |||||
| 分離試劑 | — | 500 | 500 | 500 | 500 |
| 充分搖勻， 3600轉/分離心20分鐘，吸棄上清液。用γ-測量儀測定各管沉淀的放射性計數。 | |||||
【數據處理】
1. 設S0管計數為B0，各標準管或樣品管計數為B，非特異管計數為NSB，則百分結合率計算公式為：
B/B0=(B－NSB)/( B0－NSB)×100%
以上各標準品B/B0%為縱軸，以相應濃度為橫軸，在logit-log或半對數坐標紙上繪制劑量反應標準曲線，待測樣品濃度可在標準曲線上查出。
2. 計算機處理：采用RIA數據處理軟件，選擇合適的數學模型計算結果。
【技術指標】
- 非特異結合率（NSB）：＜5%
- 零管結合率：> 30%
- 靈敏度：＜5 pg/ml。
- 精密度：批內變異系數＜10%，批間變異系數＜15%。
- 準確度：回收率94-109%.
- 標準曲線：相關系數>0.990。
- 單位換算：（pmol/ml）=（pg/ml）×3.67
【注意事項】
- 所有試劑包括待測樣品事先應在室溫平衡。使用時須充分搖勻。
- 分離試劑在2~8℃保存，不可冰凍。
- 離心速度可用3000轉/分，但至少30分鐘。離心時機內溫度在4~25℃之間。
- 不同批號試劑不能混合使用，建議樣品做雙管檢驗。
- 本實驗使用放射性同位素，操作應由經過培訓的專業技術人員按放免檢驗的規定進行。產生的放射性廢物應按國家有關規定處理。
【正常參考值】
男：青春期前：＜10 pg/ml 女：青春期前：＜8 pg/ml
成 人 ：＜70 pg/ml 卵泡期：10-90 pg/ml
排卵期：100-500 pg/ml
黃體期：50-240 pg/ml
絕經期：＜60 pg/ml
各實驗室應根據本實驗室條件和接觸的人群建立自己的正常值范圍。以上數據僅供參考。
【貯藏】2~8℃遮光保存，常溫運輸5天內不影響藥盒質量。
【有效期】一個月
雌二醇（E2）放免試劑盒怎么使用才符合操作規范
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