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TTC法測種子生活力

更新時間:2019-05-17   點擊次數:19882次

   凡有生活力的種子胚部在呼吸作用過程中都有氧化還原反應,而無生活力的種胚則無此反應。當TTC溶液滲入種胚的活細胞內,并作為氫受體被脫氫輔酶(NADH或NADPH)還原時,可產生紅色的三苯基甲 (TTF),胚便染成紅色。當種胚生活力下降時,呼吸作用明顯減弱,脫氫酶的活性亦大大下降,胚的顏色變化不明顯,故可由染色的程度推知種子的生活力強弱。TTC還原反應如下:NN+ NCl+NN+HCl(無TTFTTC色)(紅色)
【儀器與用具】
培養皿2套;鑷子1把;單面刀片1片;墊板(切種子用)1塊;燒杯1個;棕色試劑瓶;解剖針1把;搪瓷盤1個;pH試紙。
【試劑】
TTC溶液的配制:取1g TTC溶于1L蒸餾水或冷開水中,配制成0.1%的TTC溶液。藥液pH應在6.5~7.5,以pH試紙試之(如不易溶解,可先加少量酒精,使其溶解后再加水)。
【方法】
1.將玉米、小麥等作物的新種子、陳種子或死種子,用溫水(30℃)浸泡2~6h,使種子充分吸脹。
2.隨機取種子2份,每份50粒,沿種胚中央準確切開,取每粒種子的一半備用。
3.把切好的種子分別放在培養皿中,加TTC溶液,以浸沒種子為度。
4.放入30~35℃的恒溫箱內保溫30min.也可在20℃左右的室溫下放置40~60min.
5.保溫后,傾出藥液,用自來水沖洗2~3次,立即觀察種胚著色的情況,判斷種子有無生活力,把判斷結果記入表上。
【注意事項】
1.TTC溶液現配現用,如需貯藏則應貯于棕色瓶中,放在陰涼黑暗處,如溶液變紅則不可再用。
2.染色溫度一般以25~35℃為宜。
3.判斷有生活力的種子應具備:胚發育良好、完整、整個胚染成鮮紅色;子葉有小部分壞死,其部位不是胚中軸和子葉連接處;胚根尖雖有小部分壞死,但其它部位完好。 4.判斷無生活力的種子應具備:胚全部或大部分不染色;胚根不染色部分不限于根尖;子葉不染色或喪失機能的組織超過1/2;胚染成很淡的紫紅色或淡灰紅色;子葉與胚中軸的連接處或在胚根上有壞死的部分;胚根受傷以及發育不良的未成熟的種子。
5.不同作物種子生活力的測定,所需試劑濃度、浸泡時間、染色時間不同?,F將主要作物種子生活力測定所需條件列入表。
TTC法測定主要作物種子生活力要點
在35℃下
作 物 水 稻、高粱、玉米及麥類作物 棉花、蕎麥、蓖麻 花生 甜菜 大嘛向日葵 大豆 菜豆 亞麻 二葉草
種子準備 去殼縱切 縱切 剝去種皮 剝去種皮 無須準備
TTC濃度(%)
染色時間(h)0.1 0.1 1.0 0.1 1.02~3 0.5~1 2~3 3~4 3~4   
 
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