信帆生物低價銷售多酚氧化酶!
更新時間:2019-12-02 點擊次數:1486次信帆生物專業提供多酚氧化酶,產品質量穩定,*,確保銷售給客戶的產品是能夠符合質量標準,適合客戶要求的產品。本產品*,歡迎新老客戶前來咨詢訂購.
測定意義:
PPO(EC1.10.3.1)主要存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,是一種含銅的氧化酶,能使一元酚和二元酚氧化產生醌,從而引起褐化,與果蔬加工、茶葉品質和組培等密切相關。
測定原理:
PPO能夠催化鄰苯二酚產生醌,后者在525nm有特征光吸收。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液×1瓶,4℃保存;
試劑一×1瓶,4℃保存;
試劑二×1瓶,4℃保存;
試劑三×1瓶,4℃保存;
粗酶液提取:
1、收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照每500萬細菌或細胞加入1mL提取液,超聲波破碎細菌或細胞(功率20%,超聲3秒,間隔10秒,重復30次);8000g 4℃離心10分鐘,取上清,置冰上待測。
2、稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10分鐘,取上清,置冰上待測。
測定步驟:
- 分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調節波長至525nm,蒸餾水調零。
- 樣本測定(在EP管中依次加入下列試劑)
試劑名稱(μL) | 測定管 | 對照管 |
試劑一 | 200 | 100 |
試劑二 | 50 | 50 |
樣本 | 50 |
|
煮沸的樣本 |
| 50 |
37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)中準確水浴10min后,迅速放入冰浴中冷卻
試劑三 | 100 | 100 |
充分混勻,5000g,常溫離心10min,收集上清,取200μL至微量石英比色皿或96孔板中,525nm處檢測測定管和對照管吸光度,計算ΔA=A測定-A對照。
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