禽白血病抗原檢測試劑盒現貨
更新時間:2020-07-29 點擊次數:1168次禽白血病抗原檢測試劑盒現貨?
信帆生物供應禽白血病抗原檢測試劑盒現貨?,產品庫存充足,質量穩定,可用于科研,也可以用于獸醫診斷,大家有需要可找信帆生物科技有限公司訂購!
【產品簡介】
ALV可引起不同的腫瘤性疾病,包括淋巴白血病、成紅細胞瘤、成髓細胞瘤等。p27是ALV病毒群(A,B,C,D,E和J亞群)的主要gs抗原,高度保守,因而p27抗原的檢測是ALV抗原檢測的基礎。
本試劑用于檢測p27,采用稀蛋清和泄殖腔拭子樣品進行檢測,雖然血清在ALV抗原的檢測中是有效的,但由于潛在內源性病毒序列的干擾,因而在外源性病毒的檢測中不采用血清樣品。在p27抗體包被96孔反應板中,樣品中的p27抗原與包被的抗體可以形成復合物。洗掉未結合的物質后,再加入辣根過氧化物酶標記的抗p27抗體,后者與結合在孔中的p27結合。隨后,洗掉未結合的標記物,加入底物液,生成的顏色與檢測樣品中的p27含量有關。由于蛋清較粘稠,本說明書介紹了改進的樣品處理/洗滌方法。
【產品用途】
禽白血病抗原檢測試劑盒(ALV Ag)是用于檢測雞血清、泄殖腔拭子和蛋清樣品中的禽白血病病毒(ALV)p27抗原的酶聯免疫檢測試劑盒。
【產品內容】
試劑盒主要成分 | 數 量 |
抗p27抗體包被板 | 96T×2 |
陽性對照 | 0.8ml×1 |
陰性對照 | 0.8ml×1 |
酶標記抗體 | 20ml×1 |
樣品稀釋液 | 45ml×2 |
底物液 | 24ml×1 |
終止液 | 24ml×1 |
20×濃縮洗滌液 | 45ml×2 |
封口膠 | 2份 |
使用說明書 | 1份 |
【用法與判定】 按以下步驟進行:
1、需要自備的器材
1.1精密單道移液器和多道移液器
1.2一次性吸頭,
1.3 96孔酶標儀
1.4樣品稀釋試管,
1.5蒸餾水或去離子水,
1.6洗滌溶液滴加和吸取裝置(洗板機)
操作步驟中列出的試劑體積要求移液器誤差不超過±5%。
2、樣品的準備
蛋清—收集稀蛋清,無需稀釋直接加到ELISA反應板中。凍融樣品可降低其粘稠度。
泄殖腔拭子—將泄殖腔拭子加到1mL培養液中或樣品稀釋液中冷凍。檢測前,將樣品恢復至18-26℃,讓雜質沉淀下來。吸取100 μL上清,加到ELISA反應板中。
血清—用于p27的常規檢測,無需稀釋血清樣品直接加到反應板中。因為內源性病毒的干擾作用,不使用血清樣本進行外源病毒p27的檢測。
3、操作步驟 (適用于蛋清以外的樣品)
使用前應輕輕旋轉或震蕩予以混勻,所有試劑應恢復至室溫。
3.1 取出抗體包被板,記錄樣品的位置。
3.2 在適當的兩孔中分別加入100μL未稀釋的陰性對照。
3.3 在適當的兩孔中分別加入100μL未稀釋的陽性對照。
3.4 在剩余的孔內分別加入100μL被檢樣品。樣品既可采用雙孔檢測也可采用單孔檢測。樣品無需稀釋用于檢測。
3.5. 蓋好反應板蓋板,在18-26℃條件下孵育60分鐘(±5分鐘)。
3.6 用大約350μL蒸餾水或去離子水洗滌板孔,重復3-5次。后一次洗板后將液體拍干。
3.7 每孔加入100μL酶標抗體。
3.8 蓋好反應板蓋板,在18-26℃條件下孵育60分鐘(±5分鐘)。
3.9 重復步驟3.6。
3.10. 每孔加入100μLTMB底物液。
3.11 蓋好反應板蓋板,在18-26℃條件下孵育15分鐘(±1分鐘)。
3.12每孔加入100μL終止液終止反應。
3.13.測量并且記錄樣品和對照于650nm波長的吸光值A(650)。
蛋清樣品洗滌方法
稀蛋清樣品有時很難用上述標準的方法,用水*從反應板上洗掉。本試劑盒準備了20倍濃縮洗滌液,用于蛋清樣品的洗滌。
洗滌溶液的制備
20倍濃縮洗滌液應恢復至18-26℃并使沉淀的鹽溶解混勻。使用前,用蒸餾水或去離子水對蛋清濃縮洗滌液應進行20倍稀釋(例如:每板用20mL濃縮洗滌液加入380mL水中)。蛋清樣品洗滌步驟
除了步驟3.6和步驟3.9的洗滌方法外,蛋清樣品的檢測步驟與上述步驟相同。吸出對照和被檢蛋清樣品孔中的液體,每孔加入大約350μL上述制備的洗滌溶液,浸泡兩分鐘,吸出孔中液體。再重復4次,但每次不用再浸泡2分鐘。
4、結果判定
陽性對照的平均值減去陰性對照的平均值(PC`x-NC`x)必須大于0.200,陰性對照平均值必須小于或等于0.150,試驗方能有效。被檢樣品中是否含有p27抗原與其A(650)和陽性對照的平均值的比值有關。陽性對照已經標準化處理,代表顯著的抗原水平(大約10ng/mL)。被檢樣品抗原的相對含量通過計算樣品與陽性對照比值(S/P)來確定。如果S/P小于等于0.20,樣品為陰性;如果S/P大于0.20,說明樣品中存在p27抗原。
5、計算公式
【注意事項】
1.認真處理所有的ALV材料以免ALV的傳播,陽性對照可能成為ALV的傳染源,盡管陽性對照已經過化學處理滅活,但不能認為其*滅活。
2.試劑盒的一些成分含有疊氮鈉作為防腐劑。
3.處理各組分要按照當地、區域以及國家規定進行。
4.不要將TMB暴露于強光和任何氧化劑下,所有的試劑應在2-8℃儲存,所有的廢棄液應在丟棄前合理處理以免污染。
5.不要使用超過有效期的試劑,不同批次的試劑盒成分不要混用。在整個操作過程中,仔細的滴加和洗滌對結果的精確性和準確度是十分重要的。
6.按照本程序操作,將會獲得佳結果。
7.于獸醫使用。
【規格與包裝】96T×2
【貯藏與有效期】2~8℃避光保存,有效期為12個月
禽白血病抗原檢測試劑盒現貨?