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常用實驗室的制備

更新時間:2021-03-16   點擊次數:3493次

常用實驗室的制備

一、乳糖膽鹽發酵管

1、成分:蛋白胨20g,豬膽鹽(或牛、羊膽鹽)5g,乳糖10g,0.04%(質量分數)溴甲酚紫水溶液25ml,蒸餾水1000ml(PH值7.4)



2、制法:將蛋白胨、膽鹽及乳糖溶于水中,校正PH值,加入指示劑,分裝每管10ml,并放入一個小倒管,115℃高壓滅菌15min

注:雙料乳糖膽鹽發酵管除蒸餾水外,其他成分加倍。

二、營養瓊脂培養基

1、成分:蛋白胨10g,牛肉-膏3g,NaCL5g,瓊脂15~20g,蒸餾水1000ml

2、制法:將除瓊脂以外的各種成分溶解于蒸餾水內,加入15%NaOH溶液約2ml,校正PH值至7.2~7

.4。加入瓊脂,加熱煮沸,使瓊脂溶化。分裝于燒瓶(質量分數)內,121℃高壓滅菌15min。

注:此培養基可供一般細菌培養之用,可傾注平板或制成斜面。若用于菌落計數,瓊脂質量分數為1.5%;若做成平板或斜面,則應為2%

三、乳糖發酵管

1、成分:蛋白胨20g,乳糖10g,0.4g/l溴甲酚紫水溶液25ml,蒸餾水1000ml(PH值=7.4)

2、制法:將蛋白胨及乳糖溶于水中,校正PH值,加入指示劑后,按檢驗要求分裝30ml、10ml或3ml,并放入一個小倒管,115℃高壓滅菌15min

注:①雙料乳糖發酵管除蒸餾水外,其他成分加倍。②30ml和10ml。乳糖發酵管專-供醬油及醬類檢驗用,3ml乳糖發酵管供大腸菌群證實實驗用。

四、馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)

1、成分

馬鈴薯300g,葡萄糖20g,瓊脂20g,蒸餾水1000ml

2、制法

將馬鈴薯去皮切塊,加1000ml蒸餾水,煮沸10~20min。用紗布過濾,補加蒸餾水至1000ml.加入葡萄糖和瓊脂,加熱溶化,分裝,121℃高壓滅菌20min

3、用途:分離培養霉菌

五、孟加拉紅培養基

1、成分

蛋白胨5g,葡萄糖10g,MgSO4(MgSO4·7H2O)0.5g,KH2PO41g,瓊脂20g,1/3000孟加拉紅溶液100ml,蒸餾水1000ml,氯霉素0.1g

2、制法

將上述各成分加入蒸餾水中溶解后,再加孟加拉紅溶液。另用少量乙醇溶液溶解氯霉素,加入培養基中,分裝后,121℃高壓滅菌20min

3、用途:分離霉菌和酵母

六、0.1%美藍牛乳培養基

1、成分

新鮮脫脂牛乳90ml,10g/L美藍水溶液10ml

2、制法

將上述成分混合,分裝試管,121℃高壓滅菌15min

七、伊紅美藍瓊脂(EMB)

1、成分:蛋白胨10g,乳糖10g,K2HPO42g,瓊脂17g,2%(質量分數)伊紅Y溶液20ml,6.5g/l美藍溶液10ml,蒸餾水1000ml(PH值=7.1)

2、制法:將蛋白胨、磷酸鹽和瓊脂溶解于蒸餾水中,校正PH值,分裝于燒瓶內,121℃高壓滅菌15min,備用。臨用時加入乳糖并加熱溶化瓊脂,冷卻至50~55℃,加入伊紅和美藍溶液,搖勻,傾注平板。

八、革蘭氏染色法

1、結晶紫染色液

(1)成分:結晶紫1g,95%(體積分數)乙醇20ml,10g/L草酸銨水溶液80ml。

(2)制法:將結晶紫溶解于乙醇中,然后與草酸銨溶液混合。

2、革蘭氏碘液

(1)成分碘1g,KI2g,蒸餾水300ml

(2)制法:先將碘與KI進行混合,然后加入蒸餾水少許,充分振蕩,待*溶解后,再加蒸餾水至300ml

3、沙黃復染液

(1)成分:沙黃0.25g,95%(體積分數)乙醇10ml,蒸餾水90ml

(2)制法:將沙黃溶解于乙醇中,然后用蒸餾水稀釋

七、高鹽察氏培養基

1、成分:NaNO32g,蒸餾水1000ml,MgSO4(MgSO4·7H2O)0.5g,KH2PO41g,FeSO40.01g,NaCL60g,蔗糖30g,瓊脂20g,KCL0.5g

2、制法:加熱溶解分裝后,115℃高壓滅菌30min。必要時可酌量增加瓊脂。

3、用途:分離霉菌用

八、65g/LNaCL肉湯

1、成分

肉浸液(PH=7.6)100ml,NaCL6.5g

2、制法

將上述成分混合,分裝試管,121℃高壓滅菌15min

九、PH=9.6葡萄糖肉湯

普通肉湯校正PH=9.6,加入0.2%(質量分數)葡萄糖

十、40%(體積分數)膽汁肉湯

1、成分

PH=7.6肉浸液60ml,葡萄糖0.12g,牛膽汁40ml

2、制法

將上述成分混合,分裝試管,121℃高壓滅菌15min

十一、淀粉水解培養基

1、成分

PH=7.6肉浸液瓊脂90ml,羊血清5ml,30g/l淀粉溶液10ml

2、制法

1)將肉浸液瓊脂溶化

2)待冷卻至50℃左右,以無菌操作加入淀粉溶液及無菌羊血清混合后,傾注平板。

十二、精氨酸水解培養基

1、成分

蛋白胨0.1g,NaCL0.5g,K2HPO40.6g,精氨酸1g,16g/l溴甲酚紫乙醇溶液1.4ml,瓊脂0.3g,蒸餾水100ml(PH=7.2)

2、制法

將上述各成分(除溴甲酚紫乙醇溶液外)加入蒸餾水中,加熱溶解,校正PH=7.2,加入溴甲酚紫乙醇溶液,分裝試管,121℃高壓滅菌15~20min

十三、改良CHAIMERS培養基

1、成分

大豆蛋白胨3g,肉浸膏3g,酵母浸膏3g,葡萄糖20g,乳糖20g,CaCO320g,10g/l中性紅溶液5ml,硫酸多黏菌素B(100IU/ml),瓊脂15g,蒸餾水1000ml(PH=6.0)

2、制法

加熱溶解各組分,加熱至120℃高壓滅菌15~20min

十四、七葉苷培養基

十五、改良TJA培養基(改良番茄汁瓊脂培養基)

1、成分

番茄汁50ml,酵母抽提液5g,肉膏10g,乳糖20g,葡萄糖2g,K2HPO42g,吐溫801g,乙酸鈉5g,蒸餾水1000ml(PH=6.8±0.2)

2、制法

1)番茄汁的制作:將新鮮番茄洗凈,切碎(切勿搗碎),放入三角燒瓶;置4℃冰箱中8~12h,取出后用紗布過濾即可。若一次使用不完,將其置入0℃冰箱可保存4個月。使用時讓其在常溫下自然溶解。

2)培養基的制法:將所有成分加入蒸餾水中,加熱溶解,校正PH=6.8±0.2。分裝于燒瓶內,高壓滅菌121℃,15~20min。臨用時加熱溶化瓊脂,冷卻至50℃時使用。

十六、改良MC培養基

1、成分

大豆蛋白胨5g,牛肉浸膏5g,酵母浸膏5g,葡萄糖20g,乳糖20g,CaCO310g,瓊脂15g,蒸餾水1000ml,硫酸多黏菌素B(10萬單位)

2、制法

將前面7種成分加入蒸餾水中,加熱溶解,校正PH=6,加入中性紅溶液。分裝于燒瓶內,121℃高壓滅菌15~20min。臨用時加熱溶化瓊脂,冷卻至50℃,酌情加或不加硫酸多黏菌素B(檢樣有胖聽或開罐后有異味等懷疑有雜菌污染時,可加多黏菌素B,混勻后使用)



1、成分

蛋白胨5g,K2HPO41g,七葉苷3g,枸櫞酸鐵0.5g,16g/l溴甲酚紫乙醇溶液1.4ml,蒸餾水100ml

2、制法

將上述各成分(除溴甲酚紫乙醇溶液外)加入蒸餾水中,加熱溶解,加入溴甲酚紫乙醇溶液,分裝試管,121℃高壓滅菌15~20min

十七、ML7培養基

1、成分

植物蛋白胨5g,聚蛋白胨5g,牛肉-膏2.5g,酵母提取物5g,抗壞血酸0.5g,瓊脂15g,B-甘油磷酸二鈉19g,MgSO4 (MgSO4·7H2O)0.25g,蒸餾水1000ml(PH=7.1)

2、制法

加熱溶解各組分,加熱至120℃滅菌15min

十八、MRS培養基

1、成分

蛋白胨10g,肉浸膏10g,酵母浸膏5g,葡萄糖20g,吐溫80 1ml,K2HPO42g,醋酸鈉5g,檸檬酸二銨2g,MgSO4 (MgSO4·7H2O)2g,MnSO4(MnSO4·4H2O)50mg,瓊脂15g,蒸餾水1000ml(PH=6.2~6.4)

2、制法

加熱溶解各組分,于120℃滅菌15min

十九、乳酸桿菌糖發酵管

1、基礎成分

牛肉-膏5g,蛋白胨5g,酵母浸膏5g,吐溫80 0.5ml,瓊脂1.5g,16g/l溴甲酚紫乙醇溶液1.4ml,蒸餾水1000ml

2、按0.5%(質量分數)加入所需糖類,并分裝小試管

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