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上海信帆:大鼠P物質(SP)操作說明和操作步驟

點擊次數:1285 發布時間:2015/7/20
提 供 商: 信帆生物 資料大小:
圖片類型: 下載次數: 151
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大鼠P物質(SP)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書


使用目的:

本試劑盒用于測定大鼠血清,血漿,組織及相關液體樣本中P物質(SP)含量。 


 實驗原理

本試法測P物質(SP)水平化的P物質(SP)體包中依P物質(SP),再與 HRP 標記的P物質(SP)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標 抗體復合物,經過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB  HRP 酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的P物質(SP)呈正相關。用酶儀在 450nm 波長測定度(OD 過標P物質(SP)濃度。

試劑盒組成

1

30 倍濃縮洗滌液

20ml×1 

7

終止液

6ml×1 

2

酶標試劑

6ml×1 

8

標準品(480ng/L

0.5ml×1 

3

酶標包被板

12 孔×8 

9

標準品稀釋液

1.5ml×1 

4

樣品稀釋液

6ml×1 

10

說明書

5

顯色劑 A 

6ml×1 

11

封板膜

6

顯色劑 B 

6ml×1/

12

密封袋

標本要求

1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能 馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融

2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

操作步驟

1. 標準提供戶可管中行稀 釋。

240ng/L

號標準品

150μl 的原倍標準品加入 150μl 標準品稀釋液

120ng/L

號標準品

150μl  5 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液

60ng/L

號標準品

150μl  4 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液

  30ng/L

號標準品

150μl  3 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液

 15ng/L

號標準品

150μl  2 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液


2. 加樣白對孔、待測被板 50μl測樣 40μl, 然后 10μl樣品zui 5 加樣,盡 量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此

重復 5 次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同 3

8. 洗滌:操作同 5

9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色

15 分鐘.

10.  終止終止 50μl,終轉黃

11.  測定調450nm 波長依OD  加終止 液后 15 分鐘以內進行。

計算

以標準物的濃度為橫坐標,OD  值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的

OD 值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與 OD 值計算出標

準曲樣品 OD 方程再乘, 即為樣品的實際濃度。

注意事項

1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未 用完,板條應裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間 控制在 分鐘內,如標本數量多,使用排槍加樣。

4 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本 OD  大于 OD 釋液稀釋測定計 算時zui×5

5 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物請避光保存。

7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9.本試劑不同批號組分不得混用。

保存條件及有效期

12-8

2.有效期:6 個月

上海信帆代理銷售大鼠P物質檢測試劑盒,現貨供應。試劑盒靈敏度高,提供技術指導,咨詢。

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