植物原花青素??Oligomeric Proantho Cyanidins, OPC??試劑盒 說明書 (分光光度法50T/24S) 測定意義 原花色素??Oligomeric Proantho Cyanidins,OPC??是一類黃烷醇單體及??聚合體的多酚化合 物,廣泛存在于植物的各種器官中,????*的抗氧化性和清除自由基的作用,廣泛的應用 于醫(yī)藥,食品,化妝品,保健品行業(yè)?? 測定原理 在酸性條件??,植物原花青素A 環(huán)??的間苯??酚和間苯??酚??香草醛發(fā)生縮合??應,產(chǎn)生 ??色化合物,在500nm 處??特征吸收峰,測定500nm 光吸收值,可??算植物中原花青素的 含???? 自備實驗用品及儀器 天????常溫離心機??可見分光光度????1 mL 玻璃比色皿??蒸餾水??8%鹽酸和60%乙醇?? 試劑組成和配制 提取液??60%乙醇,自備,4℃保存?? 試劑一??8%鹽酸20mL,自備,4℃保存?? 試劑????粉劑0.2g×1 瓶,4℃避光保存,臨用前?? 20mL ??蒸水溶解?? 工作液??臨用前按照用??將試劑一和試劑??按照1:1 混合?? OPC 提取 將樣本烘??至恒重,粉碎,過40 目篩之后,??取約0.1g,??入2.5mL 提取液,用超聲提取 法進行提取,超聲??率300W,破碎5s,間歇8s,提取30min, 12000rpm,25℃,離心10min, 取??清,用提取液定容至2.5mL,待測?? 測定操作表 對照管 測定管 樣本??μL?? 200 200 工作液??μL?? 800 H2O??μL?? 800 混勻,30℃水浴30min, 1mL 玻璃比色皿,對照管調(diào)零,測定A500?? OPC ??算公式 標準曲線??y=0.0194x+0.0006,R2=0.999 OPC 含????mg /g??= 0.0194 0.0006 500 A − ×V ??總÷(V 樣÷V 樣總×W)×10-3 = 0.644×(A500-0.0006 ) ÷ W V 樣總????入提取液體??,2.5mL?? V ??總????應總體??,1mL??V 樣????應中樣品體??, 0.2mL?? W??樣品質(zhì)??,g 注意??項 1??配制好的試劑??應盡快使用,4℃保存時間??超過一個???? 2??吸光度變化應該控制在0.05~0.8 之間??否則??大樣品??或稀釋樣品,注意??算公式中參 ????算的稀釋倍數(shù)要相應改變?? |