谷-胱甘肽(GSH)測定試劑盒 生化試劑
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谷-胱甘肽(GSH)測定試劑盒,二硫代二硝基苯甲酸與巰基化合物反應時能產生一種黃色化合物,可進行比色定量測定。
谷-胱甘肽(GSH)測定試劑盒
(比色法)
一、測定原理:
二硫代二硝基苯甲酸與巰基化合物反應時能產生一種黃色化合物,可進行比色定量測定。
二、試劑組成與配制:(100T/96 樣)
試劑一:甲粉×1 瓶,乙液 50ml×1 瓶,4℃保存 6 個月。甲粉:加 90~100℃的熱雙蒸水 170ml,
充分溶解;
試劑一應用液的配制:將已配好的甲液與乙液充分混合。此為過飽和溶液,室溫靜置冷卻后,如
有結晶,則取上清進行實驗,室溫保存 6 個月。
試劑二:粉劑×1 瓶,用時加雙蒸水至 200ml 溶解,用我所贈送的塑料瓶室溫保存 6 個月。
試劑三:粉劑×1 支,用時加雙蒸水至 50ml 溶解,避光 4℃保存 6 個月。
試劑四:粉劑×4 支,用時每支加雙蒸水 10ml 溶解,避光冷藏可保存 5 天。
試劑五:GSH 標準品粉劑 3.07mg×3 支,4℃保存 6 個月。
試劑六:GSH 標準品溶劑貯備液 10ml×1 瓶,4℃保存 6 個月。
GSH 標準品溶劑應用液的配制:按 GSH 標準品溶劑貯備液:雙蒸水=1:9,加入 9 倍體積的雙
蒸水進行稀釋,現用現配。
1mmol/L GSH 標準品溶液的配制:GSH 的分子量為 307,每次測定前將 3.07mg 的 GSH 標
準品加入到 10ml 的 GSH 標準品溶劑應用液中,混勻,
現用現配。
20μmol/L GSH 標準品溶液的配制:取 1mmol/LGSH 標準品溶液 0.2ml 加入 GSH 標準品溶
劑應用液 9.8ml, 現用現配。
四、注意事項:
1、血液中的 GSH 幾乎全部存在于紅細胞內,可以用每升全血中 GSH 的克數來表示,也可用
每克 Hb 中 GSH 的含量來表示。
2、計算時應用消光系數,故比色計要校正波長。用標準管計算較方便、準確。
3、吸取上清時,用帶刻度的 5ml 滴管,或者用移液器,避開表面的一層薄膜,插到上清
液中吸取 2ml 做顯色反應。
4、每批試驗做 2 個標準管、空白管,以減少操作誤差。
五、測定意義:
谷-胱甘肽(GSH)是一種低分子清除劑,它可清除 O2 -、H2O2、LOOH。谷-胱甘肽是谷
氨酸、甘-氨酸和半胱-氨酸組成的一種三肽,是組織中主要的非蛋白質的巰基化合物,并且是
GSH—PX 和 GST 兩種酶類的底物,為這二種酶分解氫過氧化物所必需,它并且能穩定含巰
基的酶和防止血紅蛋白及其它輔因子受氧化損傷,最近還證明 GSH 也參與使維生素 E 恢復
到還原態的作用,缺乏或耗竭 GSH 會促使許多化學物質或環境因素產生中毒作用或加重其
中毒作用,這可能與增加氧化損傷有關,因而 GSH 的量的多少是衡量機體抗氧化能力大小
的重要因素。
谷-胱甘肽(GSH)測定試劑盒