過氧化物酶(POX)染液 生化試劑
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過氧化物酶(POX)染液,含有過氧化酶,在有受體(如聯苯胺) 存在下,催化過氧化氫放出新生態氧,使聯苯胺氧化成聯苯胺藍,再與亞硝基氰-化鈉結合成穩定的藍色顆粒定位于細胞漿中,否則聯苯胺藍可繼續脫氫,氧化為棕色的苯醒二胺。
過氧化物酶(POX)染液
(Peroxidase stain沃什伯恩(Washburn)法)
染色原理
粒細胞和單核細胞胞漿中含有過氧化酶,在有受體(如聯苯胺) 存在下,催化過氧化氫放出新生態氧,使聯苯胺氧化成聯苯胺藍,再與亞硝基氰-化鈉結合成穩定的藍色顆粒定位于細胞漿中,否則聯苯胺藍可繼續脫氫,氧化為棕色的苯醒二胺。
儲存條件及有效期
本試劑盒應置 4°C保存保存,有效期一年。試劑二應用液一定要現用現配,稀釋后的應用液只能保持 2~3 小時。
染色步驟
1、新鮮血片或骨髓片,滴加試劑一染液 5~8 滴 ,不要洗。
2、1~2min 后再滴加試劑二稀釋后的應用液 5~8 滴,混勻,放置 4~8min,清水洗。
3、加試劑三 5~8 滴,使覆蓋整個血膜,停 30 秒~1 分鐘
4、滴加試劑四 5~8 滴,與試劑三混勻,染色 8~10 分鐘
5、用清水沖洗,將血片直立晾干,也可用濾紙慢慢吸干。
染色結果
1、 陽性反應強度的判斷:
陰性 無顆粒。
弱陽性 顆粒小,分布稀疏。
陽性 顆粒略粗,分布較密集。
強陽性 顆粒粗大,呈藍黑色,充滿胞漿。
2、粒細胞系統:
早期原粒細胞陰性,晚期原粒細胞及以下階段細胞均含不同程度的藍黑色、圓形、邊緣不整齊、大小不一致的陽性顆粒,隨粒細胞的成熟而增多,直至充滿細胞漿,嗜酸性粒細胞顆粒更粗大,呈深藍色。嗜堿性粒細胞正常多為陰性。在病理狀態下有時成熟中性粒細胞可呈陰性。
3、單核細胞系統:
性或弱陽性有少數籃色顆粒,較小。,形態不規則,彌散分布,可覆蓋核上。
4、網狀細胞及吞噬細胞
網狀細胞及吞噬細胞有不同程度的陽性顆粒。
5、淋巴細胞、漿細胞、紅細胞及巨核細胞系統:
淋巴細胞、漿細胞、紅細胞及巨核細胞等均陰性。
過氧化物酶(POX)染液