丁酰膽堿酯酶實(shí)驗(yàn)代測
- 型 號:丁酰膽堿
- 參考價(jià):25~25
丁酰膽堿酯酶水解丁酰膽堿生成膽堿及乙酸丁酰膽堿酯酶實(shí)驗(yàn)代測
所有產(chǎn)品僅供科研使用,不能用于食用和醫(yī)療等
丁酰膽堿酯酶實(shí)驗(yàn)代測
測定原理:丁酰膽堿酯酶水解丁酰膽堿生成膽堿及乙酸,膽堿可以與巰基顯色劑反應(yīng)生成TNB黃色化合物,根據(jù)顏色深淺進(jìn)行比色定量,水解產(chǎn)物膽堿的數(shù)量可以反應(yīng)膽堿酯酶的活力。
丁酰膽堿酯酶是由肝臟合成的一種非特異性酯酶,由于該酶在肝臟中合成后立即釋放到血漿中,因此血清中BuChE活性是測定肝細(xì)胞蛋白質(zhì)合成功能的靈敏指標(biāo)。
丁酰膽堿脂酶又?jǐn)M稱膽堿酯酶、假性膽堿酯酶和血清膽堿酯酶。它是由肝臟細(xì)胞合成分泌進(jìn)入血液的,主要分布在肝臟、血清和淋巴液中。丁酰膽堿脂酶蛋白為四聚體,四個(gè)亞基的結(jié)構(gòu)*一樣,各包括574個(gè)氨基酸,每個(gè)亞基還結(jié)合9條糖鏈,占亞基相對分子質(zhì)量的23.9%。丁酰膽堿脂酶屬于B酯酶,在有機(jī)磷的解毒中發(fā)揮了重要作用,通過和有機(jī)磷結(jié)合,減少了血中可和丁酰膽堿脂酶結(jié)合的游離的有機(jī)磷,從而減輕丁酰膽堿堆積造成的中毒癥狀,起到了間接的解毒作用
丁酰膽堿酯酶水解丁酰膽堿生成膽堿及乙酸,膽堿可以與巰基顯色劑反應(yīng)生成TNB黃色化合物,根據(jù)顏色深淺進(jìn)行比色定量,水解產(chǎn)物膽堿的數(shù)量可以反應(yīng)膽堿酯酶的活力。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡便:全程約30分鐘,可測48例左右樣本。
2、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
3、靈敏度高:微量樣品即可測出丁酰膽堿酯酶的水平,可以分型,另有配套試劑盒可測乙酰膽堿酯酶。 4、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.6%。
5、回收試驗(yàn): X =98%。
6、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
7、測試面廣:可測動(dòng)物血液(血清 /血漿 /全血)、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞各種水產(chǎn),效果均佳。
所需儀器及自備試劑:
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀(比色測定波長為412nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、漩渦混勻器
4、微量移液器
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測定。
紅細(xì)胞:需按照試劑盒中說明書上紅細(xì)胞的測定方法進(jìn)行提取后測定。
動(dòng)物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養(yǎng)細(xì)胞:常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后直接測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發(fā)送的《實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說明書。
操作流程:
1、按步驟加入樣本和R2、R3
2、漩渦混勻,37℃孵育6分鐘
3、加入R4、R5、R6,室溫靜置15分鐘
4、412nm波長,0.5cm光徑,比色
丁酰膽堿酯酶實(shí)驗(yàn)代測