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超微量總ATP酶實(shí)驗(yàn)代測

  • 型   號:ATP
  • 參考價:25~25

ATP酶可分解ATP生成ADP及無機(jī)磷,測定無機(jī)磷的量可判斷ATP酶活力的高低。
超微量總ATP酶實(shí)驗(yàn)代測

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超微量總ATP酶實(shí)驗(yàn)代測

測定原理:ATP酶可分解ATP生成ADP及無機(jī)磷,測定無機(jī)磷的量可判斷ATP酶活力的高低。
ATP酶存在于組織細(xì)胞及細(xì)胞器的膜上,是生物膜上的一種蛋白酶,它在物質(zhì)運(yùn)送、能量轉(zhuǎn)換以及信息傳遞方面具有重要的作用,機(jī)體在缺氧及一些疾病狀態(tài)下,此酶活力發(fā)生一系列改變,另外有些遺傳疾病也與此酶活力有關(guān)。ATP酶活力的大小是各種細(xì)胞能量代謝及功能有無損傷的重要指標(biāo)。

ATP酶又稱為三磷酸腺苷酶,是一類能將三磷酸腺苷(ATP)催化水解為二磷酸腺苷(ADP)和磷酸根離子的酶,這是一個釋放能量的反應(yīng)。在大多數(shù)情況下,能量可以通過傳遞而被用于驅(qū)動另一個需要能量的化學(xué)反應(yīng)。這一過程被所有已知的生命形式廣泛利用。

 產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取樣本量100ul。
3、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
4、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
5、回收試驗(yàn): X =103.3%。
6、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
7、測試面廣:可測動物組織、紅細(xì)胞以及各種培養(yǎng)細(xì)胞、各種水產(chǎn)等,效果均佳。
所需儀器及自備試劑:
1、分光光度計/酶標(biāo)儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為636nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
5、微量移液器

樣本收集與前處理:
紅細(xì)胞:需按照試劑盒中說明書上紅細(xì)胞的測定方法進(jìn)行提取后測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養(yǎng)細(xì)胞:常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發(fā)送的《實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說明書。

操作流程:
1、酶促反應(yīng):按說明操作加入樣本100l和混合試劑,37℃準(zhǔn)確反應(yīng)10分鐘
2、加R4,3500轉(zhuǎn)/分,離心10分鐘,取上清
3、定磷:取上清液加入顯色劑,室溫靜置2分鐘加R6
4、室溫靜置5分鐘636nm波長,1cm光徑,比色

超微量總ATP酶實(shí)驗(yàn)代測

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