GST-瓊脂糖凝膠FF
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GST-瓊脂糖凝膠FF英文名稱:GST- Berpharose FF貨號:B2821規格:1ml本產品僅供科研實驗用,不做其它用途!
GST-瓊脂糖凝膠FF
英文名稱:GST- Berpharose FF
貨號:B2821
規格:1ml
1.產品介紹
GST-瓊脂糖凝膠FF是一種將谷胱-甘肽鍵合在瓊脂糖凝膠微球上形成的生物親和層析分離介質。該產品保留了瓊脂糖極-好的親水性及大網架結構,與生物活性大分子有很好的相容性,具有載量高、非特異性吸附少、流速快等特點,主要用于谷胱-甘肽轉移酶標記蛋白(GST融合蛋白)、谷胱-甘肽轉移酶和谷胱-甘肽依賴蛋白的分離純化。
2.規格
1ml(預裝柱)、5ml(預裝柱)、10ml(預裝柱)、20ml、100ml、500ml 使用方法:
①推薦緩沖液:
平衡緩沖液:10 mM PBS(140 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 1.8 mM KH2PO4, pH 7.3)。
洗脫緩沖液:50 mM Tris-HCl, 10 mM還原型谷胱-甘肽(GSH), pH 8.0
②平衡
用平衡緩沖液以操作流速平衡層析柱,觀察檢測器的變化,直到電導率、pH值等參數不變。
③上樣
切換轉換閥進行上樣,上樣量根據樣品的性質和層析介質的量進行選擇,也可進行線性實驗找到上樣量。樣品的預處理:置換緩沖液,澄清過濾(0.45μm、0.22μm)等。
④沖洗
用2~3個柱體積的平衡緩沖液沖洗上樣后的層析柱,觀察檢測器的變化,直到電導率、pH等參數不變。此時未交換的組分將被清洗出去。
⑤洗脫
一般推薦用10 mM還原型谷胱-甘肽溶液(可含緩沖成分)進行洗脫。
⑥再生
用蒸餾水按操作流速沖洗3~5個柱體積,接著用平衡液洗到平衡3~5個柱體積。再生時若有失活的蛋白質或脂類物質洗不掉,可用在位清洗(CIP)法除去。
⑦在位清洗(CIP)
去除沉淀和變性蛋白:用2個柱體積的6 M鹽酸胍清洗,立即用10 mM PBS(pH7.4)洗5個柱體積。去除強疏水蛋白:用3~4個柱體積的70%乙醇清洗,立即用10 mM PBS(pH7.4)洗5個柱體積。
6.注意事項:
1)使用時保證柱子和緩沖液的溫度一致,避免柱床內產生氣泡,影響純化效果。
2)本產品保存條件為20%乙醇,4~8℃。
3) 2-25℃,常壓,避光運輸。
4)僅供科研實驗使用。