人外周血單個核細胞分離液 生化試劑
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人外周血單個核細胞分離液,是一種用于分離人外周血單個核細胞的無菌、低內毒素水平的密度梯度分離液。
人外周血單個核細胞分離液
規(guī)格:200mL
產品簡介:
本產品是一種用于分離人外周血單個核細胞的無菌、低內毒素水平的密度梯度分離液。外周血中單個核細胞(PBMC)包括淋巴細胞和單核細胞,其體積、形態(tài)和密度與其他細胞不同,紅細胞和粒細胞密度較大,為1.090 g/mL左右,淋巴細胞和單核細胞密度為1.075~1.090 /mL,血小板為1.030~1.035 g/mL。為此利用一種密度介于1.075~1.092之間而近于等滲的溶液做密度梯度離心,使一定密度的細胞按相應密度梯度分布,從而將各種血細胞加以分離。
產品指標:
密度
滲透壓
無菌
1.077+0.001g/ml
290~350 mOsm/kg H20
0.1um 濾膜過濾
保存條件:
本產品對光敏感,應該室溫避光儲存,保質期 2 年。無菌開封后,保存于室溫
操作步驟:
1.取新鮮抗凝全血(EDTA、枸慘酸鈉或肝素抗凝均可) 或者去纖維蛋白血液,用等體積的全血及組織稀釋液或者PBS稀釋全血。
2.在離心管中加入適量分離液 (當稀釋后血液體積小于3mL時,加入3mL分離液:大于等于3mL,加入等體積分離液。但二者的總體積不能超過離心管的三分之二,否則會影響分離效果),將稀釋后的血液平鋪到分離液液面上方,注意保持兩液面界面清晰。(可以使用巴氏德吸管吸取血液,然后將血液小心的平鋪于分離液上,因為兩者的密度差異,將形成明顯的分層界面。如果樣品較多加樣時間較長,在離心之前出現紅細胞成團下沉屬正常現象。)
3.室溫,水平轉子500~1000g,離 心20~30min(血液的體積越大所需的離心力越大,離心時間越長,的分離條件需摸索,離心轉速不超過1200g)。
4.離心后將出現明顯的分層: 最上層是稀釋的血漿層,中間是透明的分離液層,血漿與分離液之間的白膜層即為單個核細胞層,離心管底部是紅細胞與粒細胞。
5.小心的吸取白膜層細胞到15mL潔凈的離心管中, 10mL PBS或細胞洗滌液洗滌白膜層細胞。
人外周血單個核細胞分離液