超微量 Ca 2+Mg 2+–ATP 酶測試盒

(測組織、培養細胞)

一、試劑組成與配制：（試劑盒有效期 6 個月）

二、樣本的前處理：

1、組織的前處理：（組織勻漿上清液制備參考實驗方法學）

準確稱取組織重量，按重量（g）：體積(mL)=1:9

的比例，加入 9 倍體積的生理鹽水，冰水浴條件下機

械勻漿，2500 轉/分，離心 10 分鐘，取上清液（即 10%

的勻漿上清液），再用生理鹽水 10 倍稀釋成 1%，同時

用考馬斯亮藍試劑測定組織蛋白（試劑本所有售）。如

果預試結果太高，再將 1%的組織勻漿稀釋成不同濃度

再進行預試后再決定取樣濃度。

2、培養細胞的前處理：將培養細胞消化，離心，棄上清，

留下層細胞，每管加 0.2～0.3mL 生理鹽水或勻漿介質

制備成 10 7 /cm3細胞懸液，即 10 7 /mL，再進行破碎。破

碎細胞的方法有三種：①、用勻漿器勻漿。②、用超聲

粉碎器粉碎。③、反復凍溶 3 次（第③種方法有時會影

響酶活力）。制備好的細胞懸液不需要離心，同時用考

馬斯亮蘭試劑測定組織蛋白（試劑本所有售）。再將細

胞勻漿液稀釋成不同濃度進行預試，根據預試結果決定

取樣濃度。

[注 1]：在測試加樣前要搖勻后取樣。

[注 2]：不可用磷酸鹽緩沖液或含磷的試劑作為樣本勻

漿或稀釋樣本。

[注 3]：預試結果將吸光度值（測定管吸光度值—

對照管吸光度值）控制在 0.2 左右為宜。

三、規范操作步驟：

1、酶促反應：

 超微量 Ca 2+Mg 2+–ATP 酶測試盒