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超微量總 ATP 酶測試盒(測組織) 生化試劑

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超微量總 ATP 酶測試盒(測組織),ATP 酶可分解 ATP 生成 ADP 及無機磷,測定無機磷的量可判斷 ATP 酶活力的高低。

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超微量總 ATP 酶測試盒(測組織)

(測組織\普通細胞)

一、測定意義:

ATP 酶存在與組織細胞及細胞器的膜上,是生物膜

上的一種蛋白酶,它在物質運送、能量轉換以及信息傳

遞方面具有重要的作用,機體在缺氧及一些疾病狀態下,

此酶活力發生一系列改變,另外有些遺傳疾病也與此酶

活力有關。

二、測定原理:

ATP 酶可分解 ATP 生成 ADP 及無機磷,測定無機

磷的量可判斷 ATP 酶活力的高低。

三、試劑組成與配制:

333.png

 

四、樣本前處理:

1、組織的前處理:(組織勻漿上清液的制備參考實驗方法

學)準確稱取組織重量,按重量(g):體積(ml)=1:9

的比例,加入 9 倍體積的生理鹽水,冰水浴條件下機械

勻漿,2500 轉/分,離心 10 分鐘,取上清液(即 10%

的勻漿上清液),再用生理鹽水 10 倍稀釋成 1%,同時

用考馬斯亮藍試劑測定組織蛋白(試劑本所有售)。如

果預試結果太高,再將 1%的組織勻漿稀釋成不同濃度

再進行預試后再決定取樣濃度

2、培養細胞的前處理:將培養細胞消化,離心,棄上清,

留下層細胞,每管加 0.2~0.3ml 生理鹽水或勻漿介質

制備成 10 7/cm 3細胞懸液,即 10 7/ml,再進行破碎。破

碎細胞的方法有三種:①、用勻漿器勻漿。②、用超聲

粉碎器粉碎。③、反復凍溶 3 次(第③種方法有時會影

響酶活力)。制備好的細胞懸液不需要離心,同時用考

馬斯亮蘭試劑測定組織蛋白(試劑本所有售)。再將細

胞勻漿液稀釋成不同濃度進行預試,根據預試結果決定

取樣濃度。

[注 1] 在測試加樣前要搖勻后取樣

[注 2]:不可用磷酸鹽緩沖液或含磷的試劑作為樣本勻

漿或稀釋樣本。

[注 3]:預試結果將吸光度值(測定管吸光度值—

對照管吸光度值)控制在 0.2 左右為宜。

超微量總 ATP 酶測試盒(測組織)

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