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谷-氨酸脫氫酶(GDH)測試盒 生化試劑

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谷-氨酸脫氫酶(GDH)測試盒,催化 NH4、a -酮戊二酸和 NADH,生成谷-氨酸和NAD,引起 340nm吸光度值下降:通過測定 34nm 處吸光度的下降速率,計算 GDH活性。

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谷-氨酸脫氫酶GDH測試盒

( Glutamate dehydrogenase 分光光度法)

測定原理

谷-氨酸脫氫酶 (Glutamate dehydrogenaseGDH)催化 NH4a -酮戊二酸和 NADH,生成谷-氨酸和NAD,引起 340nm吸光度值下降:通過測定 34nm 處吸光度的下降速率,計算 GDH活性。

自備儀器或品:

紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1ml 石英比色皿、研缽、蒸餾水。

粗酶液提取:

粗酶液提取詳見試劑盒內(nèi)說明書。測定組織和細胞同時需要測定蛋白濃度。可用本所的A045-2總蛋白定測試(馬斯亮法 A045-3A0454 定測(BCA 法進行蛋白濃度的測定。

操作步驟:

1、分光光度計預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長至 340nm蒸餾水調(diào)零

2、樣本測定:

(1) 工作液配制: 將試劑二中加入試劑一 50ml 混合解,置于恒溫水浴鍋預(yù)溫(哺乳動物37C:非哺乳動物 25C) 5min,現(xiàn)用現(xiàn)配

(2)測定: 0.95ml 工作液和 0.05ml 待測粗酶液于試管中,混勻并立即轉(zhuǎn)入 1ml 比色于波長 340nm 測得 20 秒時吸光度值 A1 5 分鐘 20 秒時的吸光度值 A2,計算A=A1-A2(將樣本加入工作液中即進行計時)

谷-氨酸脫氫酶GDH測試盒

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