蛋白質羰基含量測試盒(紫外比色法) 生化試劑
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蛋白質羰基含量測試盒(紫外比色法),可簡便、靈敏的檢測各種組織器官、血清、培養細胞(做法同組織樣本)和細胞器等蛋白質羰基含量。
蛋白質羰基含量測試盒(紫外比色法)
(紫外比色法)
一、試劑組成和配制(50 管/24 樣,貨號 A087-1-1):
試劑一:勻漿介質,無色透明液體,50mL×1 瓶;4℃保存;
試劑二:淺磚紅色液體,2.5mL×1 瓶;4℃避光保存;
試劑三:黃色液體,10mL×1 瓶;4℃避光保存;
試劑四:無色液體,10mL×1 瓶;4℃保存;
試劑五:無色液體,30mL×1 瓶;4℃保存;
試劑六:無色液體,70mL×1 瓶;4℃保存;
自備試劑:無水乙醇(分析純);乙酸乙酯(分析純);
洗滌液的配制:將無水乙醇和乙酸乙酯按照體積比 1︰1
的比例混合配置成溶液,現用現配;
二、試劑組成和配制(100 管/48 樣,貨號 A087-1-2):
試劑一:勻漿介質,無色透明液體,100mL×1 瓶;4℃保存;
試劑二:淺磚紅色液體,5mL×1 瓶;4℃避光保存;
試劑三:黃色液體,20mL×1 瓶;4℃避光保存;
試劑四:無色液體,20mL×1 瓶;4℃保存;
試劑五:無色液體,60mL×1 瓶;4℃保存;
試劑六:無色液體,70mL×2 瓶;4℃保存;
自備試劑:無水乙醇(分析純);乙酸乙酯(分析純);
洗滌液的配制:將無水乙醇和乙酸乙酯按照體積比 1︰1
的比例配置成混合溶液,現用現配;
三、操作步驟:
1、血清(漿)前處理:取血清或血漿原液進行測定(同時用
雙縮脲試劑盒(本所有售,貨號 A045-1)測定血清(漿)
中總蛋白濃度);
2、組織樣本前處理:準確稱取組織重量,按重量(g):體積
(mL)=1︰9 的比例加入 9 倍的試劑一(如準確稱取組織
重量 0.1g 加入 0.9mL 的試劑一),冰水浴條件下機械勻
漿,2500 轉/分,離心 10min,取上清即 10%勻漿 450µL,
加入 50µL 試劑二,混勻,室溫放置 10min 后,
11000r/min
離心 10min,取上清按操作表測定(同時取部分上清用考
馬斯亮藍試劑盒(本所有售,貨號 A045-2)測定勻漿的
總蛋白濃度);
四、測定意義:
一種檢測蛋白質羰基含量的試劑盒。可簡便、靈敏的
檢測各種組織器官、血清、培養細胞(做法同組織樣本)
和細胞器等蛋白質羰基含量。其使用不需要昂貴的設備,
樣品處理簡單,可廣泛應用于各種疾病如衰老、動脈硬化
癥,糖尿病和帕金森綜合癥、風濕性關節炎等疾病的早期
診斷,抗氧化保健食品、抗氧化藥物和化妝品等的評價,
還可以用于評價由于一些環境有害因子如輻射、化學毒物
等對機體造成的氧化損傷。
五、實驗注意點:
1、在用無水乙醇乙酸乙酯混合應用液對反應沉淀進行洗
滌時,漩渦混勻一定要劇烈充分,混勻時間不得少于一
分鐘,反應沉淀物必須洗滌至白色,如果沉淀物還有黃
色殘留,適當增加無水乙醇乙酸乙酯混合應用液的洗滌
次數,以保證洗滌充分,否則會使得測定結果偏高;
2、在進行蛋白質羰基測定時,離心的轉速不可以隨意降
低,否則會使得測定結果偏高;
3、在進行蛋白質羰基測定時,建議使用圓底的離心管進
行實驗,這樣在進行無水乙醇乙酸乙酯混合應用液洗滌
時,可以保證沉淀被充分洗滌。不建議使用尖底的離心
管進行實驗。
蛋白質羰基含量測試盒(紫外比色法)