甘油含量 (Glycerol)測定試劑盒 生化試劑
- 型 號:
- 參考價:0~0
甘油含量 (Glycerol)測定試劑盒,在 ATP 存在下甘油被甘油激酶磷酸化為 3-磷酸甘油,再被甘油磷酸氧化酶氧化產生過氧化氫:在過氧化氫酶作用下生色底物轉化為苯醒亞胺,光密度值與甘油濃度成正比。
甘油含量 (Glycerol)測定試劑盒
(適用于做組織樣本)
測定原理:
在 ATP 存在下甘油被甘油激酶磷酸化為 3-磷酸甘油,再被甘油磷酸氧化酶氧化產生過氧化氫:在過氧化氫酶作用下生色底物轉化為苯醒亞胺,光密度值與甘油濃度成正比。
所需設備:
酶標儀、可見光分光光度計 (721、722 型)、生化分析儀。
操作過程:
1、樣本處理:詳見說明書或本公司-技術文章部分關于樣本處理的說明。測定組織和細胞同時需要測定蛋白濃度。可用本所的 A045-2 總蛋白定量測試盒(考馬斯亮藍法)或者 A045-3、A045-4 總蛋白定量測試盒(BCA 法)進行蛋白濃度的測定。
2、標準品稀釋
用蒸餾水、生理鹽水或與樣品緩沖液一致的液體,將 4mM 甘油標準品倍比稀釋為1000、500、250、125、62.5、31.25、15.625、7.8125 mol/L,通常 4~6 管即可,注意設置 0 濃度對照反應管。
計算:
1、繪制標準曲線并計算甘油濃度。Excel 作圖步驟: 各標準管 OD 值為y軸,標準品濃度為x軸。 鼠標左鍵圈住數據,點擊做圖向導,選擇-散點圖-,點擊-完成-。@ 鼠標右鍵點圖上的某一點,點擊-添加趨勢線-,點擊-選項-,點擊-顯示公式-和-R2值-。
2、以 mg 蛋白濃度或細胞數校正甘油含量。
甘油含量 (Glycerol)測定試劑盒