超氧化物歧化酶(SOD)分型測定試劑盒2
- 型 號:
- 參考價:0~0
超氧化物歧化酶(SOD)分型測定試劑盒2,對機體的氧化與抗氧化平衡起著至關重要的作用,此酶能清除超氧陰離子自由基(O2- ·)保護細胞免受損傷。
超氧化物歧化酶(SOD)分型測定試劑盒2
(抽提法測 T-SOD 、CuZn-SOD、 Mn-SOD 比色法)
【試劑盒介紹】
本試劑盒采用黃-嘌-呤氧化酶法測定超氧化物歧化酶
(Superoxide Dismutase SOD)活力,可測血清(漿)、腦脊液、胸水、
腹水、腎透析液、尿液、紅細胞、白細胞、血小板、心肌培養
細胞、腫瘤培養細胞、各種動植物組織細胞及亞細胞水平(線粒
體、微粒體)中的 SOD 活力,并可檢測微生物、藥物、食品、
飲料、化妝品中的 SOD 活力。
【測定意義】
超氧化物歧化酶(SOD)對機體的氧化與抗氧化平衡起著
至關重要的作用,此酶能清除超氧陰離子自由基(O2- ·)保護細
胞免受損傷。
【測定原理】
通過黃-嘌-呤及黃-嘌-呤氧化酶反應系統產生超氧陰離子自由
基(O2- ·),后者氧化羥胺形成亞硝酸鹽,在顯色劑的作用下呈
現紫紅色,用可見光分光光度計測其吸光度。當被測樣品中含
SOD 時,則對超氧陰離子自由基有專一性的抑制作用,使形成
的亞硝酸鹽減少,比色時測定管的吸光度值低于對照管的吸光
度值,通過公式計算可求出被測樣品中的 SOD 活力。
高等動物細胞內只有二種 SOD 即銅鋅-SOD(CuZn-SOD)
與錳-SOD(Mn-SOD),二者相加等于總 SOD(T-SOD),經樣本前
處理過的樣本中 Mn-SOD 活力喪失,但 CuZn-SOD 活力不變。
【有效期和保存條件】
本試劑盒保存期:6 個月;貯存溫度:4℃,注意 4 號貯備
液須放在-20℃以下,溫度偏高酶容易失效,所用塑料吸嘴尖要
干凈,最好消毒,或者用雙蒸水將新吸嘴尖頭反復沖洗,一定
要避免菌類及重金屬離子污染。
【實驗中所需的儀器和自備的試劑】
550nm 的分光光度計或酶標儀、37℃恒溫水浴或氣浴箱、
臺式離心機、移液器、雙蒸水、冰醋酸(分析純,乙酸濃度
≥99.5%)。
【試劑組成與配制】
1、(50 管/24 樣,貨號 A001-2-1)試劑的組成與配制:(如您
只需做 CuZn-SOD 則可做到 48 樣)
試劑一:貯備液:5mL×1 瓶(天冷時或放冰箱會有部分結晶
析出,需 37℃加熱溶解后再用);試劑一應用液的
配制:用時每瓶 5mL 貯備液加雙蒸水稀釋至 50mL,
4℃可保存 1 年。
試劑二:液體 5mL×1 瓶,4℃~10℃可保存 1 年。
試劑三:液體 5mL×1 瓶,4℃~10℃可保存 1 年。
試劑四:貯備液:350μL×1 支,-20℃以下保存(如需多次使用,
請在第一次解凍后分裝保存);稀釋液:5mL×1 瓶,
4℃可保存 6 個月。試劑四應用液的配制:用時按貯
備液:稀釋液=1∶14 比例配制,用多少配多少,現用
現配。
試劑五:粉劑×1 支,用時加入雙蒸水 37.5mL(可在液面位置
標記一下)加熱至 70℃~80℃溶解后備用,若加熱過
程中水分蒸發減少,此時必須用雙蒸水補充至標記
處,配好后的試劑避光 4℃可冷藏 1 年。
試劑六:粉劑×1 支,用時加入雙蒸水 37.5mL 溶解后備用,配好
后試劑避光 4℃冷藏可保存 6 個月。
顯色劑的配制:按試劑五:試劑六:冰醋酸=3:3:2 的體積比配顯
色劑,用多少配多少,配好的顯色劑 4℃可避光冷藏
3 個月。
試劑七:20mL×1 瓶;4℃冷藏可保存 6 個月。
2、(100 管/48 樣,貨號 A001-2-2)試劑的組成與配制:(如
您只需做 CuZn-SOD 則可做到 96 樣)
試劑一:貯備液, 10mL×1 瓶(天冷時或放冰箱會有部分結
晶析出,需 37℃加熱溶解后再用);試劑一應用液的
配制:用時每瓶 10mL 貯備液加雙蒸水稀釋至
100mL,4℃可保存 1 年。
試劑二:液體 10mL×1 瓶,4℃~10℃可保存 1 年。
試劑三:液體 10mL×1 瓶,4℃~10℃可保存 1 年。
試劑四:貯備液 350μL×2 支,-20℃以下保存(如需多次使用,
請在第一次解凍后分裝保存);稀釋液 10mL×1 瓶,
4℃可保存 6 個月。試劑四應用液的配制:用時按貯備
液:稀釋液=1∶14 比例配制,用多少配多少,現用現
配。
試劑五:粉劑×1 支,用時加入雙蒸水 75mL(可在液面位置標
記一下)加熱至 70℃~80℃溶解后備用,若加熱過程
中水分蒸發減少,此時必須用雙蒸水補充至標記處,
配好后的試劑避光 4℃可冷藏 1 年。
試劑六:粉劑×1 支,用時加雙蒸水 75mL 溶解后備用,配好后試
劑避光 4℃冷藏可保存 6 個月。
顯色劑的配制:按試劑五:試劑六:冰醋酸=3:3:2 的體積比配顯
色劑,用多少配多少,配好的顯色劑 4℃避光可冷藏
3 個月。
試劑七:30mL×1 瓶;4℃冷藏可保存 6 個月。
【樣本前處理】
1、取樣本 0.2mL 加試劑七 0.2mL,旋渦混勻器充分混勻 1 分
鐘后,以 3500~4000 轉/分,離心 15 分鐘(臺式離心機),
取上清進行 CuZn-SOD 測定。此上清液即經過處理后的樣
本,Mn-SOD 活力喪失而 CuZn-SOD 活力不受影響。
2、同時取生理鹽水 0.2mL 加試劑七 0.2mL,旋渦混勻器充分
混勻 1 分鐘后,以 3500~4000 轉/分,離心 15 分鐘(臺式
離心機),取上清作 CuZn-SOD 對照。
注:如樣本量不夠可按比例減少樣本和試劑用量。
超氧化物歧化酶(SOD)分型測定試劑盒2