高鐵血紅蛋白(MetHb)測試盒 生化試劑
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高鐵血紅蛋白(MetHb)測試盒,血紅蛋白含量的測定:取 0.01mL 全血與 2.5mL 的 100倍稀釋的試劑一應(yīng)用液(血紅蛋白測定應(yīng)用液),混勻,靜置 5 分鐘后,1cm 光徑,雙蒸水調(diào)零,540nm處測定各管吸光度值。
高鐵血紅蛋白(MetHb)測試盒
一、試劑組成及配制:(50T/48 樣)
試劑一:血紅蛋白測定濃縮液 1mL×2 支,2~8℃保存。
血紅蛋白測定應(yīng)用液的配制:臨用前將濃縮液用雙蒸水
1∶99 稀釋,即 100 倍稀釋,現(xiàn)用現(xiàn)配。配好
的試劑 2~8℃避光保存,可存放 1 個月以上。
試劑二:高鐵血紅蛋白測定濃縮液,30mL×1 瓶,2~8℃
保存。
高鐵血紅蛋白測定應(yīng)用液的配制:濃縮液∶雙蒸水=
1∶9 稀釋,即 10 倍稀釋,可存放 6 個月以上。
試劑三:制作還原血紅蛋白曲線用
①、白色粉劑×1 支,2~8℃避光保存。
②、稀釋液,1mL×1 支,2~8℃保存。
試劑三應(yīng)用液配制:臨用前每支粉劑加入 1mL 稀釋液,
現(xiàn)用現(xiàn)配,注意避光。
試劑四:制作高鐵血紅蛋白曲線用
①、磚紅色粉劑×1 支,2~8℃避光保存
②、稀釋液,1mL×1 支,2~8℃保存。
試劑四應(yīng)用液配制:臨用前每支粉劑加入 1mL 稀釋液,
現(xiàn)用現(xiàn)配,注意避光。
二、試劑組成及配制:(100T/96 樣,貨號 A102-1-2)
試劑一:血紅蛋白測定濃縮液 1mL×4 支,2~8℃保存。
血紅蛋白測定應(yīng)用液的配制:臨用前將濃縮液用雙蒸水
1∶99 稀釋,即 100 倍稀釋,現(xiàn)用現(xiàn)配。配好的
試劑 2~8℃避光保存,可存放 1 個月以上。
試劑二:高鐵血紅蛋白測定濃縮液,60mL×1 瓶,2~8℃
保存。
高鐵血紅蛋白測定應(yīng)用液的配制:濃縮液∶雙蒸水=
1∶9 稀釋,即 10 倍稀釋,可存放 6 個月以上。
試劑三:制作還原血紅蛋白曲線用
①、白色粉劑×1 支,2~8℃避光保存。
②、稀釋液,1mL×1 支,2~8℃保存。
試劑三應(yīng)用液配制:臨用前每支粉劑加入 1mL 稀釋液,
現(xiàn)用現(xiàn)配,注意避光。
試劑四:制作高鐵血紅蛋白曲線用
①、磚紅色粉劑×1 支,2~8℃避光保存
②、稀釋液,1mL×1 支,2~8℃保存。
試劑四應(yīng)用液配制:臨用前每支粉劑加入 1mL 稀釋液,
現(xiàn)用現(xiàn)配,注意避光。
三、操作步驟:
1、制備抗凝全血:取全血立即加入到肝素抗凝管內(nèi),加
蓋封口,輕輕顛倒混勻。
2、血紅蛋白含量的測定:取 0.01mL 全血與 2.5mL 的 100
倍稀釋的試劑一應(yīng)用液(血紅蛋白測定應(yīng)用液),混
勻,靜置 5 分鐘后,1cm 光徑,雙蒸水調(diào)零,540nm
處測定各管吸光度值。
3、高鐵血紅蛋白測定: 取 0.05mL 全血,加入 2.5mL
的試劑二稀釋應(yīng)用液(即高鐵血紅蛋白測定應(yīng)用液),
混勻,靜置 5 分鐘后,1cm 光徑,雙蒸水調(diào)零,測定
630nm 處及 602nm 處吸光度值。如果沒有雙波長的
分光光度計(jì)則可以先測定各管 630nm 處吸光度值,
然后再測各管 602 nm 處吸光度值。但一定要注意各
管的編號不要弄錯。
五、注意事項(xiàng):
①、取血后應(yīng)在 1 小時內(nèi)完成實(shí)驗(yàn),否則影響測定結(jié)果,
因?yàn)榧t細(xì)胞中的還原酶可使高鐵血紅蛋白逐漸還
原,使結(jié)果降低。但可放-20℃以下冷凍保存,如果
血樣較多,可將全血分成幾小管,每次測試可取其
一小管,余下各管仍保存-20℃以下以備重復(fù)測試,
其結(jié)果不受影響。
②、本實(shí)驗(yàn)可用雙波長分光光度計(jì)測定,可同時測定
602nm 處及 630nm 處吸光度值,進(jìn)行計(jì)算。也可用
單波長分光光度計(jì)測定,可以先測定各管 630nm 處
吸光度值,然后再測各管 602 nm 處吸光度值。但
一定要注意各管的編號不要弄錯。
③、如果您實(shí)驗(yàn)室分光光度計(jì)沒有雙波長掃描功能,可
以不做標(biāo)準(zhǔn)曲線,直接用本所實(shí)驗(yàn)室 R 與 r 均為常
數(shù),R=1.81;r=0.14。
④、所用器皿要干凈。
七、檢測意義:
體內(nèi)一氧化氮彌散入血后,很快與氧合血紅蛋白結(jié)合形
成高鐵血紅蛋白(methemoglobin,MetHb),NO 與 MetHb 變
化相關(guān),故全血 MetHb 檢測近年來受到臨床的廣泛重視。同
時血液中高鐵血紅蛋白含量的測定對接觸芳香族氨基、硝基
化合物所引起的中毒性疾病的診斷與治療,有重要的意義。
八、測定原理:
高鐵血紅蛋白在 630nm 波長處有一特征吸收峰,而高鐵
血紅蛋白(MetHb)和還原血紅蛋白(Hb)在 602nm 波長處
光密度值相等,利用此關(guān)系可以通過相應(yīng)的公式算出高鐵血
紅蛋白含量。
高鐵血紅蛋白(MetHb)測試盒
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