維生素 C(VC)/抗壞血酸(ASA)測定試劑盒 檢測服務(wù)
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維生素 C(VC)/抗壞血酸(ASA)測定試劑盒 ,本法用 Fe 3+與還原型抗壞血酸迅速作用生成 Fe 2+,后者再與啡羅啉顯色反應(yīng),可以測定血漿中維生素 C 的含量。
維生素 C(VC)/抗壞血酸(ASA)測定試劑盒
(比色法)
一、 試劑盒組成及配制(50 管/48 樣):
試劑一:貯備液 5mL×1 瓶,4℃保存 6 個月。試劑一應(yīng)用液
配制:用時按照試劑一貯備液:蒸餾水=1:14 稀釋,混勻制備。
試劑二:粉劑×1 支,4℃保存 6 個月。試劑二應(yīng)用液配制:
用時 1 支粉劑加 0.36mL 的冰醋酸再加水至 40mL,
溶解,4℃保存。
試劑三:白色結(jié)晶體的粉劑×1 支,4℃保存 6 個月。試劑三
應(yīng)用液配制:因較難溶解,用前 2~4 小時加 95%
酒精或無水乙醇 60mL 充分溶解制備,4℃保存。
試劑四:黃色貯備液 0.2mL×1 瓶,冰箱 4~8℃避光保存,
貯存時間 6 個月。試劑四應(yīng)用液配制:用時取
0.15mL 試劑四貯備液加水至 25mL 制備。(現(xiàn)用現(xiàn)配)
試劑五:液體 6mL′1 瓶,4℃保存 6 個月。
試劑六:Vc 標準品:粉劑 6mg×3 支,每瓶內(nèi)含維生素 C,
4℃避光保存 6 個月。
600mg/mL Vc 標準品應(yīng)用液配制:將 1 支標準品粉劑溶于
10mL 試劑一應(yīng)用液中,制備。
6mg/mL Vc 標準品應(yīng)用液配制:取 600mg/mL Vc 標準品應(yīng)
用液再用試劑一應(yīng)用液 100 倍稀釋備用,現(xiàn)用現(xiàn)配。
注:維生素 C 標準品易氧化,因此,最好在樣本上清液制
備好后再配標準,并在 10 分鐘內(nèi)進行檢測。
二、 操作步驟:
1、上清液制備:取樣本 0.15mL 加試劑一應(yīng)用液 0.45mL,旋
渦混勻,放置 15 分鐘后離心,3500~4000
轉(zhuǎn)/分,離心 10 分鐘,上層清亮液體為上清
液。(注:液體樣本可直接取 0.15mL 加試
劑一應(yīng)用液處理制備上清液;組織樣本必須
先制作勻漿(組織勻漿可參考本公司
“技術(shù)文章")后取 0.15mL 勻漿液加試劑一
應(yīng)用液處理制備上清液)
四、 測定原理:
本法用 Fe 3+與還原型抗壞血酸迅速作用生成 Fe 2+,后者
再與啡羅啉顯色反應(yīng),可以測定血漿中維生素 C 的含量。
五、 測定意義:
維生素 C 在體內(nèi)參與膠原物質(zhì)合成,是脯-氨酸羥化酶和
賴氨酸羥化酶的輔因子,是催化多巴胺轉(zhuǎn)變成去-甲腎上腺素
的銅酶多巴β羥化酶所必需,當維生素 C 缺乏時,合成的膠
原得不到充分的羥化,不能很好的形成纖維。
維生素 C 的化學活性是作為還原劑,它可以將
Fe 3+還原成 Fe 2+,促使鐵在腸道吸收,促進鐵的貯存和利用。
抗壞血酸作為自由基清除劑,可以很快地與 O2 -、H2O2
反應(yīng),更快地與 OH-反應(yīng)生成抗壞血酸自由基,它也可以清
除 O2 -,因此,抗壞血酸可以保護機體免受內(nèi)源性氧自由基的損傷。
維生素 C 能與a-生育酚自由基還原成維生素 E,間接
地起著鏈阻斷劑作用。
維生素 C 是血漿中的抗氧化劑,是細胞外液抗
氧化防御系統(tǒng)的第一道防線,Vc 對血漿中正在進行著的脂
質(zhì)過氧化作用也有阻斷作用。
維生素 C(VC)/抗壞血酸(ASA)測定試劑盒